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細胞培養(yǎng)之支原體檢測方法~支原體檢測培養(yǎng)法

更新時間:2022-03-17  |  點擊率:1020

細胞培養(yǎng)過程中,由于實驗環(huán)境、操作者鼻腔口腔、實驗器材等很多地方都有支原體的存在。因此,細胞發(fā)生支原體污染的頻率很高。據(jù)美國數(shù)據(jù)統(tǒng)計,細胞發(fā)生支原體污染的幾率在70%以上。

同時,由于支原體直徑很小,僅在180nm~350nm之間,只有通過電鏡才能看到。因此,支原體污染不易被實驗者肉眼發(fā)覺。而支原體污染是個循序的過程,普通抗生素對其無效。因此,被支原體污染的細胞會持續(xù)受到影響,導致實驗數(shù)據(jù)不準確。

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之前我們說過兩種檢測方法:支原體常規(guī)PCR法和支原體檢測qPCR,今天介紹的是:支原體檢測方法之培養(yǎng)法

它的原理:從可疑的細胞培養(yǎng)體系中取樣,接種到適宜支原體生長的瓊脂平板上。如果樣本中含有支原體,它們就會在這種瓊脂平板上瘋kuang生長,最終形成明顯可見的特征性菌落。

它的優(yōu)點:在選用合適培養(yǎng)基以及合規(guī)要求操作下,這種方法很少會出現(xiàn)假陰性結(jié)果,檢測精確度很高,因此被譽為支原體檢測金標準。

它的缺點也比較明顯,操作時間太長,至少30天才能出結(jié)果,滿足不了大多數(shù)質(zhì)檢部門的要求。無法檢測出死亡的支原體。



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